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如何選擇HPLC還是UHPLC?

更新時間:2022-02-25      點(diǎn)擊次數(shù):2566
  UHPLC是一種專門的液相色譜方法,與 HPLC 相比,它運(yùn)行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過使用填充較小顆粒(通常直徑小于 2 µm)的較小色譜柱來實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和許多其他領(lǐng)域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質(zhì)、肽、代謝物、藥物化合物還是其他化學(xué)物質(zhì)。
 
  盡管 UHPLC 的性能明顯更好,但它并不總是*。在您考慮改用 UHPLC 時,恒譜生將幫助您區(qū)分重要和不重要的內(nèi)容。
 
  為什么選擇 UHPLC?
 
  盡管 UHPLC 和 HPLC 在各種情況下都有優(yōu)勢,但有時 UHPLC 顯然是*。特別是,UHPLC 提供了更好的分離度,因?yàn)樗鼈兊闹宇w粒更小。但研究人員并不總是需要這種能力。恒譜生建議您需要考慮哪種分離將在可管理的時間內(nèi)提供最佳效率。如果您在五分鐘內(nèi)分離兩種組分并且每天只進(jìn)行幾次分析,則不太可能需要 UHPLC,因?yàn)?HPLC 的分離度既足夠又相對快速。
 
醫(yī)學(xué)
  即使您不需要更高的分離能力,UHPLC 仍然可以提高您的通量。更高的色譜分離度可用于提高復(fù)雜樣品的分離能力,或通過使用更短的分析色譜柱并保持分離度來提高分析速度,因此無論是高通量應(yīng)用還是高分辨率分析,都將從 UHPLC 中獲益最多。
 
  選擇 UHPLC 的注意事項(xiàng)
 
  UHPLC 在色譜柱內(nèi)使用較小的顆粒,恒譜生1.8粒徑的超純硅膠色譜填料能夠讓您的色譜分析效果與速度大大提升。粒徑和形狀緊密分布,減少背壓,批次穩(wěn)定性一致,可重復(fù)利用。因?yàn)槭褂帽容^小的粒徑所以需要更大的力來驅(qū)動溶劑和樣品通過色譜柱。
 
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  UHPLC 需要能夠在比 HPLC 中使用的泵更高的壓力下工作的泵。另一方面,雖然 UHPLC 系統(tǒng)的初始成本通常高于其對應(yīng)的 HPLC 系統(tǒng),但總體擁有成本實(shí)際上可能更低。與 HPLC 系統(tǒng)相比,UHPLC 系統(tǒng)可以用更少的試劑產(chǎn)生更快的結(jié)果,并且增加的通量可以提高生產(chǎn)力。在這種情況下,UHPLC 系統(tǒng)較高的初始成本實(shí)際上可能會在幾年內(nèi)節(jié)省實(shí)驗(yàn)室資金。
 
  盡管存在差異,但新型柱填料開始模糊 HPLC 和 UHPLC 之間的界限。例如,對于 HPLC 和 UHPLC,新的“核殼”或“多孔”顆粒提供比傳統(tǒng)柱顆粒更好的性能。核殼顆粒具有更大的表面積,這意味著它們在較低的工作壓力下優(yōu)于傳統(tǒng)的顆粒表親。對于 HPLC 和 UHPLC,平衡設(shè)備成本和性能變得更加靈活。無論您需要簡單的高通量分離還是更高的分離能力,UHPLC 都在不斷發(fā)展以滿足比以往更多類型的需求。
 
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