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高效液相色譜儀是進(jìn)行定量分析，雜質(zhì)檢查等分析工作中主要的精密儀器，液相色譜柱是液相色譜儀的最核心部件。在這里，介紹一下液相色譜柱使用中的注意事項及使用心得。液相色譜柱使用心得：柱頭類型和不銹鋼毛細(xì)管接頭的匹配色譜柱是消耗品，不是儀器原配的情況很多，如果接頭和柱頭深度匹配將會產(chǎn)生漏液或者死體積過大的現(xiàn)象。接頭比柱頭深度長，不易擰緊而漏液；接頭比柱頭深度短，柱頭內(nèi)留有空隙而產(chǎn)生死體積，使譜帶展寬和峰拖尾。溶劑的匹配轉(zhuǎn)換液相色譜柱內(nèi)保存溶劑和儀器系統(tǒng)內(nèi)存留溶劑，如果和流動相不匹配，...

制備柱具有各種尺寸，可以實現(xiàn)高分辨率分析和快速的分析。在制備色譜中，達(dá)到高純度、高回收率和高通量的分離十分重要。制備柱主要應(yīng)用在植物化學(xué)、藥物合成、生物化學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品的提取及純化工作中。不同的工作領(lǐng)域中組分的制備和純化量的差異較大。在生物技術(shù)領(lǐng)域中，酶的分離是μg級；在天然產(chǎn)物化學(xué)和合成化學(xué)領(lǐng)域中，為應(yīng)對未知成分定性鑒別、結(jié)構(gòu)測定、生物活性測試等要求，需要純化若干mg級的高純物；在藥品和醫(yī)藥學(xué)測試中，需要g級的標(biāo)準(zhǔn)品和對照品；在工業(yè)級提純中，目標(biāo)產(chǎn)物工業(yè)化生產(chǎn)往往需要kg級...

1.高壓勻漿法裝填液相色譜柱將填料懸浮在適宜的勻漿液中制成勻漿，在其尚未沉降之前，很快以高壓泵將其以很高的流速壓進(jìn)柱中，便可制備出填充均勻的柱子。這是常見的分析和制備色譜柱的裝填方法。2.濕法裝填對于柱、特別是現(xiàn)在流行的以3-10μm細(xì)柱徑填料填裝的分析柱，則必須使用濕法，即勻漿法裝柱。因為，隨著粒徑的縮小，因靜電作用和表面能的加大，粒子間傾向于聚集和“粘結(jié)”，若以干法填裝，它們會粘附在連接管及柱壁上，也會因強(qiáng)烈的靜電作用彼此排斥，因而難以填裝出均勻而緊密的柱床。這樣，必須改...

C18色譜柱因鍵合方式的不同、粒徑的不同、長度的不同，內(nèi)徑的差異等多方面因素，呈現(xiàn)出不同選擇性。柱填料的選擇關(guān)系到色譜分離的可能性，而柱規(guī)格的選擇直接影響分析速度、分離能力、檢測能力及每次分析的溶劑消耗等。柱規(guī)格包括兩方面：柱內(nèi)徑和柱長度。柱內(nèi)徑，分析型一般為2～6mm,制備型20mm，大者可達(dá)80mm；柱長度，分析型5～30cm，制備型15～50cm。一般來說，柱內(nèi)徑不影響分離度與分析時間的關(guān)系。今天，柱技術(shù)已發(fā)展到不同柱內(nèi)徑的柱子能夠具有相同的性能。不同內(nèi)徑的柱子又各具特...

日常分離分析工作中，c18液相色譜柱的使用和維護(hù)十分重要，液相色譜柱使用是否得當(dāng)，直接影響柱子的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。液相色譜柱的正確使用：（1）柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動，以免柱床產(chǎn)生空隙。（2）如果儀器用來做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱子的壽命。（3）避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的...

1)在pH值正常范圍內(nèi)(2~8)可選用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱，具有峰形好，重現(xiàn)性高和壽命長的特點(diǎn)，選用較短的柱子可以提高分離效率，選用較長的柱子可以增加保留，選用小顆粒度的填料可以提高分離度，對分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。2)分離極性大的組分(流動相水相過大)采用AQ類似的色譜柱。3)分離生物堿類的化合物選用經(jīng)過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。4)極端酸性條件下(pH小于2)選用ZorbaxStableBondC18類色譜柱或者寬pH值色譜柱。5)低端...