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選擇用作HPLC分析流動相的溶劑是色譜分析過程的關(guān)鍵步驟。到現(xiàn)在為止，沒有一種能夠滿足所有分析需求的通用溶劑，而且根據(jù)分析要求所使用的溶劑組合會變得更多。選擇合適的溶劑是根據(jù)其物理性質(zhì)以及與樣品、色譜柱固定相的相容性。流動相溶劑選擇的一般要求是：溶劑應(yīng)當(dāng)是高純度，溶劑與固定相不互溶，并能保持色譜柱的穩(wěn)定性，建議使用純水或者液相色譜專用的溶劑；溶劑的性能與使用的檢測器應(yīng)當(dāng)匹配；溶劑對樣品應(yīng)有足夠的溶解能力，樣品要*溶于流動相。如果有不溶的樣品將導(dǎo)致流動相分離或懸浮，會導(dǎo)致后續(xù)一...

目前已知的化合物中，80%都需要用高效液相色譜法來分析，它以快速、高效、靈敏度好、分離效率高和適用范圍廣等特點在各領(lǐng)域成分測定中得到肯定與使用，藥典將液相色譜法作為許多成分測定的標(biāo)準(zhǔn)分析方法。高效液相色譜法是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上建立起來的，HPLC的不同之處在于，它需要更加粒徑小的色譜硅膠填料，更高壓力的泵、柱效更好的高效色譜柱。粒徑更加小的色譜填料意味著能有更高的柱效，但是這樣也帶來液相系統(tǒng)內(nèi)部壓力增大的問題。系統(tǒng)內(nèi)部壓力高，對泵、色譜柱、保護(hù)柱、管路都是一個考驗。uH...

液相色譜柱在色譜儀分析系統(tǒng)中起著分離作用，是色譜分析的核心部件。正確使用和維護(hù)色譜柱尤為重要，使用不當(dāng)會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。以下從幾個方面簡答介紹液相色譜柱在使用過程中應(yīng)當(dāng)著重注意的問題。一、避免壓力和溫度的急劇變化溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行，以保持色譜柱內(nèi)填料的穩(wěn)定性。二、避免直接改變?nèi)軇┑慕M成在需要改變檢測樣品溶液組成是，應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，...

流動相被稱為HPLC系統(tǒng)的生命線，它起著至關(guān)重要作用：將樣品輸送通過分離柱，然后輸送至檢測器以鑒定分離出的成分。流動相通常很少是單一的溶劑，它是水與有機溶劑相組合制成，比如水與極性溶劑的緩沖液或有機溶劑按所需比例混合組成。常用的兩種操作模式是：等度洗脫—在等度模式下，流動相的組成在整個分析過程中保持不變。即混合物中溶劑的比例是預(yù)先確定的，并且在分析過程中只使用這一種流動相溶劑。梯度洗脫—通過軟件以預(yù)定模式通過分析運行改變組成，運行結(jié)束時溶劑的比例與初始比例不同。在進(jìn)行色譜分析...

高效液相色譜廣泛應(yīng)用于各種領(lǐng)域的樣品分析測定，其中C18反相色譜柱可以分析絕大多數(shù)的化合物，是一款常用且入門的色譜柱。柱子在使用中，日常的維護(hù)和活化該如何去做呢？恒譜生帶大家了解！uHPLCs恒譜生建議在使用一款新的液相色譜柱前，最好進(jìn)行柱性能試驗，記錄試驗條件和結(jié)果，作為今后評價柱性能變化的參考。柱效對于色譜柱是一個非常重要的考慮因素，想要分析結(jié)果好就一定要好好保養(yǎng)色譜柱，維護(hù)它的高柱效。測試時要注意：你的測試環(huán)境與條件應(yīng)該按照色譜柱出廠報告中的條件進(jìn)行，這樣測得的結(jié)果才有...

c18色譜柱的柱效能是評價色譜性能的一項重要指標(biāo)，混合物能否在色譜柱中得到分離，除取決于選擇合適的固定相外，還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關(guān)。高效液相色譜柱的正確使用包含：加裝保護(hù)柱，過濾流動相和樣品，凈化樣品，避免過高的柱壓，注意溫度和酸堿度，正確及時的沖洗等。1、加裝保護(hù)柱保護(hù)柱的作用是過濾掉來自流動相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時也可以有效除去流動相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器，但濾...