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什么是固定相?簡(jiǎn)而言之就是在色譜分離中固定不動(dòng)、對(duì)樣品產(chǎn)生保留的一相。固定相的選擇對(duì)樣品的分離起著重要作用,有時(shí)甚至是決定性的作用。不同類型的色譜采用不同的固定相,如氣-固色譜的固定相為各種具有吸附活性的固體吸附劑;氣-液色譜的固定相是載體表面涂漬的固定液,液相色譜中的固定相為各種鍵合型的硅膠小球,離子交換色譜中的固定相為各種離子交換劑,排阻色譜中的固定相為各種不同類型的凝膠等等。以下,恒譜生將簡(jiǎn)單帶大家了解一下固定相的不同類型以及它們有什么特點(diǎn)。正相色譜正相色譜柱填料極性強(qiáng)...
色譜保護(hù)柱在液相分析中是至關(guān)重要的,保護(hù)柱能夠過(guò)濾色譜系統(tǒng)內(nèi)部污染和樣品污染,從而達(dá)到保護(hù)色譜柱的效果。特別是做中藥、天然產(chǎn)物、合成物等基質(zhì)復(fù)雜的樣品分析檢測(cè)時(shí),建議使用恒譜生色譜保護(hù)柱。因?yàn)榛|(zhì)復(fù)雜,樣品溶解度差異不同,樣品析出污染色譜柱的幾率大大增大,梯度洗脫時(shí)影響更大,使用恒譜生液相保護(hù)柱能夠有效過(guò)濾污染物,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。生物樣品分析時(shí)也建議使用保護(hù)柱預(yù)柱,它可先于色譜分析柱承受樣品的不可逆吸附導(dǎo)致的污染,從而延長(zhǎng)分析柱壽命。既然保護(hù)柱這么好,我們?cè)撊绾翁暨x合適...
關(guān)于液相色譜柱的使用注意事項(xiàng),一般有以下幾點(diǎn):1.加裝保護(hù)柱保護(hù)柱的作用是過(guò)濾掉來(lái)自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時(shí)也可以有效除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污染,因此,加裝保護(hù)柱是必要的,特別是在分析中藥、中成藥等復(fù)雜混合物和生物樣品時(shí)更是保護(hù)分析柱不可少的措施。保護(hù)柱填料應(yīng)與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護(hù)柱屬消耗品,經(jīng)過(guò)一定次數(shù)的樣品分析...
檢測(cè)液相色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,可以對(duì)液相色譜柱進(jìn)行老化了。1.老化的方法:老化的方法通常是將液相色譜柱升至一恒定溫度,通常為其溫度上限。特殊情況下,可加熱至使用溫度之上約10~20℃左右,但是一定不能超過(guò)液相色譜柱的溫度上限,那樣極易損壞液相色譜柱。當(dāng)?shù)竭_(dá)老化溫度后,記錄并觀察基線。初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升,在到達(dá)老化溫度后5~10分鐘開(kāi)始下降,并且會(huì)持續(xù)30~90分鐘。當(dāng)?shù)竭_(dá)一個(gè)固定的值后會(huì)穩(wěn)定下來(lái)。如果在2~3小時(shí)后基線仍無(wú)法穩(wěn)定或在15~20分鐘后仍無(wú)明顯的下降...
經(jīng)常使用色譜柱進(jìn)行色譜分析的同學(xué),常常會(huì)有困惑,為什么柱子使用一段時(shí)間后柱效下降?柱效下降主要是因?yàn)樯V柱在系統(tǒng)里受到來(lái)自樣品或者系統(tǒng)內(nèi)部的污染,這些化學(xué)污染物讓柱頭塌陷或者柱篩板堵塞,柱效不僅下降還會(huì)縮短柱子的使用壽命。由此可見(jiàn),避免色譜柱被污染,是維護(hù)柱效和延長(zhǎng)色譜柱使用壽命的有效手段。污染物從何而來(lái)?比如樣品帶來(lái)的污染主要是樣品未*溶解或流動(dòng)相和樣品之間發(fā)生反應(yīng)析出沉淀物。如果是經(jīng)常對(duì)中藥、合成物、生物制品進(jìn)行分析的同學(xué)就會(huì)深有感觸,這些樣品基質(zhì)非常復(fù)雜,導(dǎo)致分析柱受污...
色譜用戶最期望的液相色譜分析:最高的分辨率、最大可達(dá)到的靈敏度、最快的分析速度??梢哉f(shuō),又快又好,是每個(gè)行業(yè)都追求的目標(biāo)。為了這個(gè)目標(biāo),誕生了超高效液相色譜(UPLC)法,與傳統(tǒng)的HPLC相比,UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍,它縮短了分析時(shí)間,同時(shí)減少了溶劑用量降低了分析成本。除了以上這些,uplc還有哪些優(yōu)勢(shì)或者不同呢?尺寸大小與HPLC分析柱4.6mm內(nèi)徑X250mm長(zhǎng)的尺寸相比,UHPLC色譜柱通常更短更窄,大概在2.1mm內(nèi)徑X50...